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食用菌總糖含量測定方法

作者: 來源:發布時間:2008-08-11 00:00:00
  食用菌總糖含量測定方法
    
    1 主題內容與適用範圍
      本標準規定了食用菌產品中總糖含量的測定方法。
      本標準適用於黑木耳、銀耳和茯苓三類食用菌中總糖的測定。本標準不適用於蛋白質含量高的其他菇類(蘑菇、香菇、平菇等)中總糖含量的測定。
    
    2 引用標準
      GB 12530 食用菌取樣方法
      GB 12531 食用菌含水量測定
    
    3 方法提要或原理
      黑木耳、 銀耳和茯苓中水溶性糖和水不溶性多糖經熱稀鹽酸徹底水解後轉化成還原糖,還原糖可用費林氏容量法定量,以此計算出樣品中總糖含量。
    
    4 試劑
      分析中,除另有說明,均限用分析純試劑、蒸餾水或相當純度的水。
    4.1 氫氧化鈉(GB 629)。
    4.2 濃鹽酸(GB 622):密度1.18g/mL。
    4.3 氫氧化鈉(GB 629)溶液:6mol/L。
    4.4 費林氏試劑
    4.4.1 A液:溶解69.28g五水合硫酸銅(GB 665,CuSO4・5H2O)於水中,定容至1000mL,過濾後備用。
    4.4.2 B液:溶解346g酒石酸鉀鈉(GB 1288,NaKC4H4O6・4H2O)和100g氫氧化鈉(4.1)於水中,定容至1000mL,過濾後備用。
    4.5 葡萄糖標準溶液:精確稱取烘幹的葡萄糖1.0000g,精確到0.0001g,用水溶解,加入5mL濃鹽酸(4.2),再以水配製成10g/L濃度溶液定容至1000mL,成為1g/L濃度溶液。
    4.6 次甲基藍(HG B33 94)指示液:10g/L。
    
    5 儀器、設備
    5.1 電熱鼓風幹燥箱。
    5.2 小型植物粉碎機:備有1mm孔徑的金屬篩網。
    5.3 玻璃研缽:備有研杵。
    5.4 分樣篩:備有孔徑0.84mm(20目)篩子。
    5.5 分析天平:感量0.0001g。
    5.6 電熱水浴鍋。
    5.7 廣口瓶:帶磨口。
    5.8 濾紙:直徑15cm。
    5.9 玻璃三角漏鬥:直徑75mm。
    5.10 圓底燒瓶:250mL,上部插有作回流用的30cm長玻璃管。
    5.11 容量瓶:250、1000mL。
    5.12 量筒:100mL。
    5.13 燒杯:25、500mL。
    5.14 錐形瓶:250mL。
    5.15 移液管:5、10、20mL。
    5.16 酸式滴定管:50mL。
    5.17 稱量瓶。
    5.18 廣範pH紙。
    5.19 可調電爐:0~600W,附石棉網。
    5.20 玻棒和滴管。
    
    6 樣品
    6.1 取樣方法和數量
    6.1.1 幹製品按GB 12530中規定要求進行。總量不得少於100g。
    6.1.2 鮮耳和鮮茯苓在每批不同的地方隨機取樣作為原始樣品,總量不得少於1000g。
    6.2 試樣的製備
    6.2.1 幹品直接用剪刀剪成小塊,在80~100℃幹燥箱中烘至發脆後冷卻,立即用小型植物粉碎機粉碎。棄去開始粉碎出的樣品(約占總樣十分之一)。粉碎過的樣品需過20目篩。未能過篩部分經烘幹之後再次粉碎或經缽內研磨之後再次過篩,直至全部樣品過篩為止。過篩後的樣品裝入清潔的廣口瓶內。樣品密封後填寫標簽,注明品名、日期、交樣單位和取樣人等。
    6.2.2 鮮耳取樣後用手撕成小塊,鮮茯苓則需去皮後用小刀切成小塊。樣品均勻地攤在幹燥箱內墊有紗布的鐵絲網上,50℃鼓風幹燥6h以上,待樣品半幹後再逐步提高溫度至80~100℃。樣品發脆之後冷卻,立即用粉碎機粉碎。其他操作同幹品。 
    
    7 分析步驟
    7.1 稱樣和水解:稱取約0.25g試樣,精確到0.0001g,小心地倒入圓底燒瓶中,加100mL水和10mL濃鹽酸(4.2)。燒瓶瓶口插上回流用的玻璃管,置100℃沸水浴上水解3h。冷卻後過濾。濾渣用100mL水無損地洗回到圓底燒瓶中(用滴管小心地操作),再加酸10mL,重複上述操作。合並兩次過濾液,用6mol/L氫氧化鈉溶液(4.3)調節pH至 中性(用pH紙測試),適當加熱濃縮後定容至250mL。同時,按GB 12531中規定的方 法稱樣並測定試樣的含水量。
    7.2 費林氏液的標定:準確吸取費林氏A液(4.4.1)和B液(4.4.2)各5mL於 250mL錐形瓶中,混勻,加玻璃珠數粒,置於石棉網上加熱。快速從滴定管中放入葡萄糖標準溶液(4.5)49mL,調節溫度,使之在2min內沸騰,保持微沸2min,期間加入次甲基 藍指示液(4.6)3滴;隨後逐滴加入葡萄糖標準溶液,直至藍色褪盡。滴定過程須在3min總沸騰時間內完成。10mL費林氏混合液需耗葡萄 糖標準溶液50mL左右。該滴定值為所配製的費林試劑標定值。在大批樣品測定時,可將A、B液等體積混合後標定和使用,混合液保存不宜超過一個月。
    7.3 試樣液的滴定:250mL錐形瓶中加入費林A、B液各5mL,混勻,再加入試樣液10~20mL,加玻璃珠數粒,置於石棉網上加熱。在正式滴定前, 應先用一份試樣進 行粗滴定,一邊加熱一邊逐滴加入葡萄糖標準液,確定出試樣液大致耗糖體積。正式滴定時,錐形瓶加熱後應快速從滴定管中放出比實際少1mL左右的葡萄糖標準液,其他操作同費林氏液的標定。
    
    8 分析結果的計算
    8.1 計算
    
    總糖(幹基,以葡萄糖計,%)=〔(V0-V1)×0.001×250]/V2×m×(1-X)〕×100 
    
    式中:V0── 10mL費林氏混合液耗葡萄糖標準液的體積,mL; 
    V1── 試樣液滴定時耗葡萄糖標準液的體積,mL; 
    V2── 試樣液吸取體積,mL; 
    m── 試樣的質量,g; 
    0.001── 1mL葡萄糖標準液中葡萄糖質量,g; 
    250── 兩次水解液合並後定容的體積,mL; 
    X── 樣品含水量,%。 
    
    8.2 允許差
      取平行測定結果的算術平均值作為測定結果,保留小數後一位。
      平行測定結果的絕對差值不大於1.0%。 

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